儿童肺结核支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测的诊断准确性研究

目的探讨支气管肺泡灌洗液的Xpert MTB/RIF检测对儿童肺结核的诊断价值。方法有疑似活动性结核病的临床症状和体征，行纤维支气管镜检查并留取了支气管肺泡灌洗液的患儿为研究对象。以支气管肺泡灌洗液作为病原学检测标本，分别以病原学诊断活动性结核病和临床诊断活动性结核病为金标准，以Xpert MTB/RIF为待测标准，考察Xpert MTB/RIF对病原学和临床诊断结核的诊断价值。基于样本中结核分枝杆菌（MTB）的Ct值反映所检测样本中MTB的载量；通过对利福平耐药位点的检测，对MTB菌株进行药物敏感性检测。结果符合本文纳入标准的疑似结核病患儿351例，男198例，女153例，年龄（5.9±3.9）岁。肺结核患儿125例，其中病原学诊断结核43例（34.4%），临床诊断结核82例（65.6%）；肺结核合并支气管结核51例（40.8%），单纯肺结核74例（59.2%）；非结核呼吸道感染性疾病226例，肺炎支原体肺炎187例（82.7%），细菌性肺炎39例（17.3%）。Xpert MTB/RIF在病原学诊断和临床诊断结核的敏感度分别为79%(95%CI：63%~89%)和51%(95%CI：40%~62%)，差异有统计学意义（χ2=9.18，P=0.002）；肺结核合并支气管结核的敏感度为80%（66%~90%),单纯肺结核的敏感度47%(35%~59%)；病原学诊断和临床诊断结核、合并支气管结核和单纯肺结核特异度均为100%(95% CI：97.9%~100%)。Xpert MTB/RIF检测病原学诊断结核敏感度高于临床诊断结核，肺结核合并支气管结核敏感度高于单纯肺结核，差异有统计学意义（χ2=13.88，P<0.001）；支气管肺泡灌洗液的MTB核酸检出载量病原学诊断结核高于临床诊断结核，差异有统计学意义（χ2=7.37，P=0.025）。76例Xpert MTB/RIF检测阳性患儿中，利福平耐药2例（2.6%）。结论支气管肺泡灌洗液的Xpert MTB/RIF检测在儿童肺结核诊断中具有较高价值，可在缺乏细菌学诊断证据的临床诊断结核病儿童中发现MTB，具有较高的敏感度，有助于提高儿童结核病病原学检出率。     

KLF5对吉西他滨诱导的肺腺癌细胞凋亡的促进作用及其机制

目的 研究krüppel-like factor 5基因（KLF5）的表达对吉西他滨介导的肺腺癌细胞凋亡的影响及分子机制。 方法 在体外培养的肺腺癌细胞H441中,分别转染KLF5表达质粒和空载体对照质粒培养68 h后,加入100 nmol/L的凋亡诱导药物吉西他滨处理4 h,使用细胞计数和流式细胞术方法检测细胞增殖和凋亡; Western blot检测KLF5蛋白的表达,RT-PCR检测KLF5及凋亡相关基因CD95和BAX的表达;免疫荧光染色比较凋亡相关蛋白Caspase 3的表达。 结果 Western blot结果证明KLF5转染成功。无吉西他滨诱导情况下,KLF5高表达对H441细胞的凋亡无显著影响,CD95和BAX基因的表达差异无统计学意义;吉西他滨诱导情况下,与对照组相比,KLF5高表达的H441细胞中凋亡细胞比例增加（P<0.05）,CD95和BAX基因的表达上升（P<0.05）,Caspase 3的表达上调。 结论 在吉西他滨诱导下,体外KLF5高表达促进肺腺癌细胞H441的凋亡。其机制可能是通过抑制细胞增殖和修复激活Caspase 3、CD95和BAX等细胞凋亡通路相关蛋白实现。     

ABCC 2基因1249G>A多态位点与先天性间隔缺损的相关性研究

目的探讨ABCC2基因1249GA多态位点与先天性间隔缺损的相关性。方法选择2013年3月至2015年3月,于四川大学华西第二医院儿童心血管科就诊,并被确诊为先天性间隔缺损的300例患儿为研究对象,纳入病例组。其中,单纯膜周部室间隔缺损(Pm-VSD)及继发孔型房间隔缺损(s-ASD)各为150例,分别纳入Pm-VSD亚组与s-ASD亚组。选择同期因单纯呼吸道感染于病例组同一家医院住院治疗的300例患儿,纳入对照组。采用PCR测序,对病例组与对照组患儿ABCC2基因1249GA多态位点基因型进行检测。采用成组t检验,对病例组与对照组、Pm-VSD亚组与对照组、s-ASD亚组与对照组患儿的年龄进行比较。采用χ~2检验,对病例组与对照组、Pm-VSD亚组与对照组、s-ASD亚组与对照组患儿性别构成比、ABCC 2基因1249GA多态位点GG、GA、AA基因型频率进行比较。采用单因素非条件logistic回归分析,对病例组与对照组、Pm-VSD亚组与对照组、s-ASD亚组与对照组患儿ABCC 2基因1249GA多态位点不同遗传模型的基因型频率进行比较。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试患儿监护人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书。结果①病例组及对照组、Pm-VSD亚组及与对照组、s-ASD亚组与对照组患儿的性别构成比及年龄比较,差异均无统计学意义(P0.05)。②病例组、Pm-VSD亚组、s-ASD亚组及对照组ABCC 2基因1249GA多态位点基因型频率分布,均符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ~2=0.880,P=0.820;χ~2=0.246,P=0.913;χ~2=1.042,P=0.748;χ~2=0.110,P=0.925)。③病例组患儿ABCC2基因1249GA多态位点GG、GA、AA基因型频率分别为67.0%(201/300)、30.7%(92/300)、2.3%(7/300),对照组分别为80.7%(242/300)、18.0%(54/300)、1.3%(4/300),Pm-VSD亚组分别为62.3%(94/150)、35.1%(52/150)、2.6%(4/150),s-ASD亚组分别为71.3%(107/150)、26.7%(40/150)、2.0%(3/150),病例组与对照组、Pm-VSD亚组与对照组、s-ASD亚组与对照组患儿ABCC 2基因1249GA多态位点GG、GA、AA基因型频率比较,差异均有统计学意义(χ~2=14 503,P=0.001;χ~2=17.132,P0.001;χ~2=5.005,P=0.042)。④对ABCC 2基因1249GA多态位点不同遗传模型的基因型频率,进行单因素非条件logistic回归分析的结果显示,病例组与对照组ABCC2基因1249GA多态位点隐性模型(GG、GA/AA)基因型频率与等位基因(G、A)频率比较,差异均有统计学意义(OR=2.0,95%CI:1.4～3.0,P0.001;OR=1.9,95%CI:1.3～2.6,P0.001)。在隐性模型((GG、GA/AA)中,GA/AA基因型患儿先天性间隔缺损发病风险,是GG基因型患儿的2.0倍;携带A等位基因患儿先天性间隔缺损发病风险,是携带G等位基因患儿的1.9倍。但是,2组ABCC2基因1249GA多态位点显性模型(GG/GA、AA)基因型频率比较,差异无统计学意义(P0.05)。⑤在对先天性心脏病(CHD)类型进行分层分析后,对ABCC2基因1249GA多态位点不同遗传模型的基因型频率,进行单因素非条件logistic回归分析的结果显示,Pm-VSD亚组与对照组ABCC2基因1249GA多态位点隐性模型(GG、GA/AA)基因型频率与等位基因(G、A)频率比较,差异均有统计学意义(OR=2.5,95%CI:1.6～3.9,P0.001;OR=2.2,95%CI:1.5～3.2,P0.001)。在隐性模型(GG、GA/AA)中,GA/AA基因型患儿Pm-VSD发病风险,是GG基因型患儿的2.5倍。携带A等位基因患儿Pm-VSD发病风险,是携带G等位基因患儿的2.2倍。s-ASD亚组与对照组ABCC 2基因1249GA多态位点不同遗传模型中,隐性模型(GG、GA/AA)基因型频率与等位基因(G、A)频率比较,差异均有统计学意义(OR=1.6,95%CI:1.0～2.6,P=0.040;OR=1.6,95%CI:1.0～2.4,P=0.038)。在隐性模型(GG、GA/AA)中,GA/AA基因型患儿s-ASD发病风险,是GG基因型患儿的1.6倍;携带A等位基因患儿s-ASD发病风险,是携带G等位基因患儿的1.6倍。结论 ABCC2基因1249GA多态位点与先天性间隔缺损存在相关性。     

支气管肺发育不良及肺动脉高压有关信号通路研究现状

支气管肺发育不良(BPD)是早产儿的主要并发症之一。中至重度BPD患儿中,约25%可能并发BPD相关肺动脉高压(PH),是影响BPD患儿病死率增高及后期生存质量降低的主要原因。目前针对上述BPD及其相关PH的预防与治疗方法尚有限,因此深入研究其发病机制,进而进行针对性有效治疗刻不容缓。近年研究发现,在BPD及其相关PH发生、发展过程中,许多相关信号通路存在异常,如血管生成素(Ang)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)-β、Wnt、结缔组织生长因子(CTGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)10、微小RNA(miRNA)、小窝蛋白(Cav)-1信号通路等,这些加深了临床对BPD及其相关PH发病机制的理解,并为其治疗提供了新思路。笔者拟就BPD及其相关PH所涉及相关信号通路研究现状进行阐述。